Page 48 - עלון הנוטע אפריל 2015

‫באור‪ ,‬כפי שנעשה במיקרוסקופ רגיל‪ .‬באופן זה ניתן לבטל אור שמה‬ ‫א‬
‫קורו מחוץ לפוקוס ומתקבלת תוצאה באיכות גבוהה יותר בהשוואה‬
‫למיקרוסקופ אור‪ .‬תוצאות הסריקה הנקודתית נרשמות באמצעות‬ ‫איור ‪:1‬‬
‫גלאי ומורכבות להדמיה של הדגימה‪ ,‬שנראית על צג המחשב‪ .‬הסריה‬ ‫צילום במיקרוה‬
‫קה נעשית בחתכי עומק שונים של הדגימה ומאפשרת דימות תלת‬ ‫סקופ קונפוקלי‬
‫מימדי שלה)‪ .‬במקביל נבדק שעור הפירות עם סדקי פיטם‪ .‬מכל‬ ‫של חתכים‬
‫עץ נלקחו ‪ 20‬פירות‪ ,‬הפירות הסדוקים נספרו ושיעורם חושב מכלל‬ ‫דרך קליפה‬
‫הפרי‪ .‬אנליזה סטטיסטית של נתוני ההיסטולוגיה (מספר תאים ועובי‬ ‫של תפוח ׳פינק‬
‫קוטיקולה) ושל שיעור הפרי הסדוק נבחנה ‪-‬ב‪ ANOVA-‬חד‪-‬כיוונית ב�א‬ ‫ליידי׳ בוגר‬
‫באזור הפיטם‪.‬‬
‫מצעות תוכנת ‪.JMP‬‬ ‫א ‪ -‬פרי‬
‫ביקורת ללא‬
‫תוצאות ודיון‬ ‫ריסוס‪ ,‬ב ‪ -‬פרי‬
‫שרוסס שלוש ב‬
‫‪ 0‬קליפת פרי בוגר שטופל בסופרלון בשלב פנולוגי של חלוקות תא‬ ‫פעמים בשלב‬
‫מכילה תאי אפידרמיס ׳מרחפים׳ בשכבת הקוטיקולה‪ :‬חתכים ידניים‬ ‫חלוקת התאים‬
‫מאזור הפיטם של פרי בוגר ומהטיפולים השונים נבחנו במיקרוסקופ‬ ‫ב‪0.1%-‬‬
‫קונפוקלי‪ .‬בקליפה של פרי ביקורת ללא ריסוס (איור ‪1‬א) ניתן לראות‬ ‫סופרלון‬
‫תאי אפידרמיס בעלי מבנה משולש (סימון ‪ )E :‬הממוקמים בבסיס ש�כ‬
‫בת הקוטיקולה (חץ מקווקו עם סימון ‪ )Ct‬ומתחתם תאי ההיפודרמיס‬ ‫‪ -‬חץ מקווקוו מסמן את עובי הקוטיקולה (‪ )Ct‬וניתן לראות כי בפרי המטופל (ב)‬
‫בעלי מבנה אליפטי‪ ,‬המקביל לפני שטח הפרי (סימון ‪ .)H :‬בחתך קל�י‬ ‫הקוטיקולה עבה יותר‪ .‬בפרי הביקורת (א) תאי אפידרמיס בעלי מבנה משולש‬
‫פה של פרי שטופל ב‪ 0.1%-‬סופרלון (‪ 20‬ח”מ‪ ,‬איור ‪1‬ב) ניתן לראות כי‬ ‫(סימון ‪ )E :‬ממוקמים בבסיס הקוטיקולה‪ ,‬ומעליהם ועד הקצה החיצוני של הק�ו‬
‫שכבת הקוטיקולה עבה יותר ומכילה תאי אפידרמיס רבים (סימון‪,)E‘ :‬‬ ‫טיקולה אין תאים נוספים‪ .‬מתחת לתאי האפידרמיס ישנם תאי היפודרמיס (סימון‪:‬‬
‫המאורגנים בקבוצות של שניים‪-‬שלושה‪ .‬תמונות דומות התקבלו עבור‬
‫‪ ,)H‬בעלי מבנה אליפטי‪.‬‬
‫חתכי קליפה מפירות שטופלו ב‪ 0.2%-‬סופרלון (‪ 40‬ח״מ)‪.‬‬ ‫‪ -‬בפרי שרוסס בסופרלון (ב) כל שכבת הקוטיקולה‪ ,‬מבסיסה ועד שוליה החיצוה‬
‫תוצאות דומות התקבלו כאשר חתכי קליפה מקובעים בפרפלסט‬
‫נבחנו במיקרוסקופ אור‪ .‬קליפה של פירות בוגרים שטופלו בסופרה‬ ‫ניים‪ ,‬מכילה תאי אפידרמיס רבים (סימון ‪ )E‬המנותקים משכבת ההיפודרמיס‪.‬‬
‫לון בשלב הפרי הצעיר הכילה תאי אפידרמיס רבים שהיו מנותקים‬ ‫‪ -‬בר = ‪ 20‬מיקרומטר‪.‬‬
‫משכבת ההיפודרמיס ונראו כ׳מרחפים׳ בשכבת הקוטיקולה‪ ,‬בניגוד‬
‫לקליפה של פרי ביקורת‪ ,‬בה לא נצפו תאים אלה‪ ,‬או שהיו בודדים‬ ‫איור ‪:2‬‬
‫כאלה (תמונות לא מוצגות)‪ .‬חתכי קליפה אלה שימשו למדידות של‬ ‫שיעור פירות‬
‫עובי קוטיקולה וספירות תאים בפרי מהטיפולים השונים‪ ,‬חמישה‪-‬‬ ‫קטיף סדוקים‬
‫שישה פירות מכל טיפול‪ .‬הנתונים עברו אנליזה סטטיסטית ומוצגים‬ ‫באזור הפיטם‬
‫לאחר ריסוס‬
‫בטבלה‪.‬‬ ‫סופרלון על‬
‫הפרי הצעיר‬
‫טבלה‪ :‬מספר תאי אפידרמיס ועובי קוטיקולה בפירות של ׳פינק ליידי׳ (‪210‬‬ ‫בשלב חלוקות‬
‫תאים או בשלב‬
‫יום משיא פריחה) שרוססו בסופרלון בשלב חלוקת תאים של הפרי הצעיר‬ ‫התרחבות‬
‫(שלב ‪ ,)I‬או בתחילת שלב התרחבות התאים (שלב ‪)II‬‬ ‫תאים (‪)II‬‬
‫‪ -‬הערכים מייצגים ממוצע של ‪ 20‬פירות‪.‬‬
‫תאי אפידרמיס‬ ‫עובי סך הכל‬ ‫טיפולי סופרלון‬ ‫‪ -‬ממוצעים המסומנים באות שונה שונים משמעותית זה מזה ב‪ P ≤ 0.05-‬על פי‬
‫מבחן ‪ ANOVA‬עם תוכנת ‪.JMP‬‬
‫קוטיקולה תאי אפידרמיס (‪ )%‬בכל קבוצה‬
‫אור‪ .‬מספר תאי אפידרמיס נקבע ליחידת אורך ש ל ‪ 500‬מיקרומטר קליפה‪ .‬עובי הק�ו‬
‫מקובעים‬ ‫מנותקים‬ ‫בקליפה‬ ‫‪39.1B‬‬ ‫ביקורת‬ ‫טיקולה נמדד מבסיס תאי האפידרמיס ועד לקצה הקוטיקולה בשלושה אזורים לאורך‬
‫‪87.3A‬‬ ‫‪12.7B‬‬ ‫‪23.5BC‬‬ ‫‪38.5B‬‬ ‫‪ X 0.025%‬שלושה ריסוסים‪ ,‬שלב ‪I‬‬
‫‪67.3B‬‬ ‫‪32.7A‬‬ ‫‪21.6C‬‬ ‫‪48.3A‬‬ ‫החתך ההיסטולוגי (איור ‪.)1‬‬
‫‪53.8B‬‬ ‫‪46.2A‬‬ ‫‪32.0AB‬‬ ‫‪39.2B‬‬ ‫‪ X 0.1%‬שלושה ריסוסים‪ ,‬שלב ‪I‬‬ ‫אותן דגימות פרי שימשו להכנת חתכים ידניים לבחינה תחת מיקרוסקופ קונפוקלי (במיה‬
‫‪59.0B‬‬ ‫‪41.0A‬‬ ‫‪34.8A‬‬ ‫‪44.3AB‬‬ ‫‪ X 0.2%‬שלושה ריסוסים‪ ,‬שלב ‪I‬‬ ‫קרוסקופ קונפוקלי קרני לייזר סורקות את הדגימה נקודתית ולא שוטפות את הדגימה‬
‫‪56.8B‬‬ ‫‪43.3A‬‬ ‫‪36.5A‬‬ ‫‪ X 0.2%‬שלושה ריסוסים‪ ,‬שלב ‪II‬‬

‫‪ -‬חושב אחוז תאי האפידרמיס המקובעים לתאי ההיפודרמיס בבסיס שכבת הקוטיה‬
‫לה בהשוואה לתאים מנותקים ה׳מרחפים׳ בשכבת הקוטיקולה‪.‬‬

‫‪ -‬התוצאות מייצגות ממוצע של ארבעה עד שישה פירות לכל טיפול‪.‬‬
‫‪ -‬ערכים ממוצעים המסומנים באות שונה לאורך העמודה נבדלים משמעותית זה‬

‫מזה ב‪ P ≤ 0.05-‬על פי מבחן ‪.ANOVA‬‬

‫‪‘ 48 ‘Alon Hanotea’ vol. 69 April 2015‬עלון הנוטע’ שנה ס”ט‪ ,‬אפריל ‪2015‬‬